前言
肝是人体和高等动物的消化器官之一,位于腹腔右上部,分为两叶。其主要功能是分泌胆汁,储藏糖原,调节蛋白质、脂肪和糖类的新陈代谢等,还有解毒和凝血作用,对于维持人体生理稳态具有重要意义。人多能干细胞经诱导分化为肝类器官,在建立疾病模型、药物筛选和毒性评价方面发挥重要作用。逸漠生物研制的hiPSC诱导肝类器官试剂盒能在体外短时间内诱导生成类器官,并且生成的的肝类器官具有成熟的肝细胞和肝干/祖细胞,大大缩短肝类器官的培养时间,加速研究效率,推进对肝类器官的探索。类器官作为目前研究的热点受到了广泛关注,而能诱导分化为类器官的人多能干细胞对类器官的发展及其重要。通过在不同阶段对人多能干细胞的生长进行调控,使其按受控的方向分化,并逐渐诱导分化成肝类器官。随着研究的深入,肝类器官的诱导方法也越来越简洁,为肝的相关研究创造了良好的科研环境。hiPSC诱导肝类器官试剂盒是专用于诱导人多能干细胞分化为肝类器官的培养试剂盒,包含了适合肝类器官生长的基础培养基、诱导细胞分化所需的添加物和Matrigel,即买即用,不含动物源成分,具体产品信息如下。(1)成分明确:不含血清,使用非动物源的Wnt及重组蛋白,明确的肝祖细胞分化体系,短期内即可在体外生成肝类器官。
分化第0天:当人多能干细胞汇合度达到75%-80%左右开始诱导分化为肝类器官,分化第0天使用基础培养基1+补充剂A+补充剂B配成DE培养基1,诱导人多能干细胞向内胚层细胞分化;24h后,将基础培养基1+补充剂A配成DE培养基2,将人多能干细胞诱导分化为内胚层细胞;
分化第3天:吸弃培养基,将基础培养基2和补充剂C配成完全培养基,诱导内胚层细胞分化成肝特化谱系细胞,在37℃,5%CO2培养箱中培养5天;
分化第8天:基础培养基3+补充剂D混合均匀配成3D肝类器官培养基,并将肝特化谱系细胞消化后用Matrigel胶埋,用3D肝类器官培养基进行长期培养至肝类器官成熟。
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