血清是细胞培养体系中不可或缺的关键成分,提供氨基酸、维生素、生长因子等5000+种生物活性物质,维持胞代谢与增殖。
但传统血清(如胎牛血清FBS)存在批次波动、伦理争议、污染风险三大痛点。
01
血清类型及其应用场景表
血清类型 | 采血牛龄 | 特点 | 典型应用场景 | 来源 |
胎牛血清(FBS) | 剖腹产胎牛 | 低免疫球蛋白(<10%)、高生长因子,适合干细胞/肿瘤细胞培养 | 干细胞研究、基因治疗载体生产 | 乌拉圭/澳洲 |
新生牛血清 | 出生24小时内 | 性价比高($50/L),但纤维蛋白原含量低,易受凝血干扰 | 普通细胞株培养、疫苗生产 | 美国/巴西 |
小牛血清 | 出生10-30天 | 免疫球蛋白含量高(可能干扰实验),适合病毒包装与工业生产 | 疫苗生产、生物制药 | 欧洲/南美 |
羊血清 | 成年羊 | 含独特生长因子,适合免疫学实验与特殊细胞系培养 | ELISA检测、抗体生产 | 澳大利亚 |
02血清评估维度表
评估维度 | 评价标准 |
细胞适配性 | ≥90%存活率得满分,干细胞培养需特级胎牛血清。 |
批次稳定性 | CV≤8%得满分,推荐锁定3-5个平行批次。 |
成本效益 | 每mL成本≤$1.5,国产血清可降低30%成本。 |
伦理合规性 | 无动物源血清(如重组人白蛋白)优先。 |
技术支持 | 提供检测报告与定制化方案(如Ausbian血清支持支原体检测)。 |
03使用避坑指南
1、实验室解冻技巧!
分步解冻法:-20℃→4℃过夜→室温完成,避免蛋白质变性。
离心去沉淀:3000rpm离心10分钟去除纤维蛋白
2、什么时候需要热灭活?
仅推荐用于免疫学实验(如ES细胞培养),可能降低细胞增殖率15%。
替代方案:使用无补体血清或添加EDTA。
3、做好污染防控!
内毒素控制:<3EU/mL
支原体检测:每批次必检,阳性率需<0.1%
04未来趋势:血清替代方案合成生物学
微生物发酵生产重组生长因子,成本降低60%。
植物基替代
大豆蛋白提取物纯度达98%,已用于昆虫细胞培养。
3D培养适配
水凝胶基质+无血清培养基组合,提升干细胞分化效率至85%。
常见问题Q&A
Q1:血清出现絮状物怎么办?
A1:多为纤维蛋白或脂蛋白变性,4000rpm离心5分钟可去除,无需过滤。
Q2:"黑胶虫"现象如何解决?
A3:加强无菌操作,更换血清批次,必要时使用无血清培养基。