产品名称:中国仓鼠卵巢细胞;CHO
品牌:FuHeng
货号:FH0005
形态特征:上皮样
生长特性:贴壁生长
培养条件:1640+10%FBS
T25 细胞复苏
1、 从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的 15ml 离心管中,1000rpm 离心5min;
3、弃上清,沉淀用 5ml 完全培养基重悬,接种 T25 培养瓶,于 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
细胞传代
1、细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 T25 培养瓶中的培养液,用PBS 清洗细胞一次:
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3、弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,补充新的完全培养基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养;
细胞冻存
1、细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 T25 培养瓶中的培养液,用PBS 清洗细胞一次;
2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入 1ml/支的富衡无血清冻存液(FH7001),混匀后加入冻存管中。(如:冻一支,加入 1ml 无血清冻存液)
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要将细胞转入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放 24 小时以上。本库的细胞系(株)仅用于科研工作。
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