碧云天研发生产的Beyo3D™ PI染色液(Beyo3D™ PI Staining Solution)，是一种快速、便捷的用于3D培养的细胞球或类器官等坏死细胞的细胞核染色的溶液。仅需染色10分钟就可在荧光显微镜下观察到坏死细胞中非常明亮的细胞核红色荧光染色。

PI，即Propidium Iodide，简称PI，中文名为碘化丙啶，分子式为C27H34I2N4，分子量为668.40。

PI是一种核酸红色荧光染料，它不能穿透活细胞的细胞膜，只能染色细胞膜完整性丧失的坏死细胞，并与核酸结合发出明亮的红色荧光，常用于坏死细胞(Necrosis)包括凋亡晚期丧失细胞膜完整性的继发性坏死细胞的检测。

本产品适用范围广。本产品可用于常规方法培养出的3D细胞球或类器官，包括超低吸附细胞培养板、Matrix-Gel™基质胶或Matrigel包被的平板、琼脂糖包被的平板、细胞悬滴培养板等。

本产品使用便捷，整个检测过程仅需约10-30分钟即可完成。3D细胞球经凋亡、坏死等诱导处理后，仅需加入本产品避光孵育10分钟即可进行荧光检测。本产品对3D培养的HCT-116细胞的染色效果参考图1。

图1.碧云天Beyo3D™ PI染色液(C1352)对于3D培养的HCT-116细胞的染色效果图。5000个HCT-116细胞在使用碧云天3D细胞培养包被试剂盒(U形底96孔板) (C0366)包被的U形底96孔板中培养48小时，不同浓度Camptothecin (SC0141)诱导细胞球坏死过夜，然后吸除培养液后未经固定处理直接加入Beyo3D™ PI染色液染色10分钟。结果显示，Beyo3D™ PI染色液对于药物诱导坏死的3D细胞染色效果清晰、明亮，且3D细胞球内部的坏死更严重一些，同时无药物处理组无明显PI荧光染色。实际检测效果会因细胞株、实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

传统的细胞培养大多以二维(Two-dimensional, 2D)的形式展开，但2D培养的细胞在生长方式、生长形态、分化和功能等方面都与体内生理条件下细胞的真实形态和结构存在明显差异，可能会因为细胞结构和组织形态的缺失，使实验结果的可信度降低[1-3]。三维(Three-dimensional, 3D)细胞培养能够更好地模拟体内细胞生存的微环境，更能代表体内组织，也能更真实的反应细胞与细胞间、细胞与基质间的相互作用，细胞对外源性和内源性刺激的应答也更接近于它们在体内的反应，3D细胞培养从而成为更有价值并更为可信的体外实验模型，能够获得与体内实验更加一致的实验结果[4-5]。

3D肿瘤细胞模型越来越多地被用于了解疾病机制和药物研发。2D培养的肿瘤细胞，其单侧细胞膜可以均匀地获得营养和氧气，而3D培养的肿瘤细胞团的内部细胞获得营养和氧气的机会更少，形成自然的营养和氧气梯度，能更好地模拟体内微环境条件，因此3D培养的肿瘤球状体(Spheroid)或肿瘤类器官(Organoid)等能更好地模拟体内肿瘤，更利于小分子药物筛选或者肿瘤相关分子机制的研究，也更能准确地预测药物治疗的体内反应、疗效或毒性。同时，2D肿瘤细胞模型体外扩增有一定局限性，在传代后容易丧失原肿瘤的遗传异质性，出现优势克隆选择性，从而降低临床相关性。相比于2D细胞模型，3D细胞球或者类器官很多情况下能提供更可信的研究结果，简化并加速药物评价流程。自2009年小肠类器官首次建立至今，3D细胞和类器官研究已经扩展到很多组织系统，并成为生命科学最热门的领域之一。

按照96孔板每孔100μl Beyo3D™ PI染色液，本产品每10ml包装可以进行100个样品的检测。

包装清单：

保存条件：

-20ºC避光保存，一年有效。

注意事项：

本产品反复冻融可能会降低染色效果，为保证最佳使用效果，请尽量避免反复冻融，第一次解冻后可以适当分装保存。

细胞球在外力的作用下容易变形或分散，PBS洗涤及换液等过程须轻缓，避免破坏或吹散3D细胞球。

不同种类的细胞球对凋亡或坏死诱导剂的耐受可能存在一定的差别，3D细胞球经凋亡或坏死诱导后，形态可能会发生一些变化，在染色前可以镜下观察细胞球的形态，可以酌情考虑是否选择形态比较完整的细胞球进行染色分析。

本产品浓度经过碧云天的优化，确保可以满足坏死细胞染色及各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的PI，请选购碧云天的 Propidium Iodide/碘化丙啶(ST511)。

荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

PI对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。