主要产品包括:
品名(货号) cOmplete Tablets EDTA-free (04693132001)
别名 蛋白酶抑制剂
剂型 片剂
组成 几种具有广泛抑制特异性的蛋白酶抑制剂专有混合物
质控 用胰腺提取物进行性能测试
包装 每包含20片药片(单独包装在铝箔泡壳中)
溶解性 溶于水性缓冲液,或直接添加到提取溶液中。也可采用2ml 水或 100mM 磷酸盐缓冲液(pH7.0) 制备25×储备溶液。储备溶液可在 2至8℃下稳定保存1-2周或在-15至-25℃下稳定保存至少12周; 在15至25℃下可以在含硫醇的溶液中使用。(使用拇指根部(而非 指甲)小心的将片剂从箔泡包装中挤出以防止片剂断裂)。
特异性 几种蛋白酶抑制剂的混合物。用于抑制丝氨酸、半胱氨酸,但不用于 抑制金属蛋白酶。
工作浓度 每50ml 提取液加入1片
工作溶液制备 一片不含EDTA 的 cOmplete 片剂足够用于50ml 提取溶液中的蛋白 酶抑制。当蛋白水解活性非常高时,应25ml 提取缓冲液使用一片。 片剂可以直接加到提取溶液中。也可制备储备溶液(25X 浓度)。
储备溶液制备(25X 浓 度) 将一片不含 EDTA 的cOmplete 片剂溶于2ml 蒸馏水或2ml100mM 磷酸盐缓冲液(pH7.0)。
储存条件(工作溶液) 储备溶液可以在2至8℃下储存1至2周,或在-15至-25℃下储存 至少12周。
储存温度 2-8℃(也可-15-25℃条件下储存)
其他说明 仅用于生命科学研究,不可用于诊断。
◆说明:
不含EDTA的cOmplete 蛋白酶抑制剂片剂可抑制广泛的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。与其他 cOmplete 片剂相比,不含 EDTA螯合剂,保持金属依赖性蛋白质的稳定性和功能不受影响。利用IMAC (固 相金属亲和色谱)进行的多聚His 标签融合蛋白亲和纯化也得到了简化(无需透析)。由于优化了 片剂的成分,对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用,并且非常适合保护从动物组织、植 物、酵母和细菌中分离的蛋白质。不含 EDTA的 cOmplete 片剂同时含有不可逆和可逆的蛋白酶抑 制剂。金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含 EDTA 的 cOmplete 片 剂 与 cOmplete 片 剂 相 同 , 唯 一 的 区 别 是 不 包 含EDTA 或 其 他 螯 合 剂
(例如 EGTA)。
*应用:
cOmpleteTM,不 含EDTA, 能有效抑制细菌、酵母、植物和动物细胞提取物中的丝氨酸和半胱氨酸 蛋白酶。金属及天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含 EDTA的 cOmplete片剂用于抑制大体积(高达50ml) 的蛋白水解活性,其中EDTA可能干 扰蛋白质稳定性(例如,含金属的蛋白质)或随后的检测。由于EDTA 会对 IMAC (固相金属亲和 色谱)产生干扰,不含 EDTA 的cOmplete 更适合多聚His 标签融合蛋白的分离过程。
如需在更小的体积(最高达10ml)内对蛋白酶活性进行抑制,我们推荐使用不含EDTA 的cOmpleteMini. 不含 EDTA的 cOmplete 片剂可按片/50 ml 孵育液进行添加。用罗氏通用蛋白酶底物(酪蛋白、 试卤灵标记的)测定蛋白水解活性。需要在酸性 pH 范围内提取或单步分离时,只需加入胃蛋白酶 抑制剂和不含EDTA的cOmplete 片剂,即可确保抑制天冬氨酸(酸性)蛋白酶。所有实验均在 +15℃至+25℃下进行。
应用实例:
●裂解转染人胚肾 (HEK293T) 细胞的裂解缓冲液,以及用于斑马鱼胚胎均质的放射免疫沉淀测定 体系(RIPA) 裂解缓冲液。
●用于海马组织均质的组织蛋白提取试剂(T-PER)。
●用于肝细胞裂解的十二烷基硫酸钠(SDS) 裂解缓冲液。
特点和优势:
使用cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可以保护蛋白质免于被广泛的蛋白酶降解。在短短几分钟内,不 受抑制的蛋白酶水解活性即可降解您花费数天分离的蛋白质。这些方便的水溶性片剂中各自含有蛋 白酶抑制剂的混合物,能抑制大多数细胞类型(包括动物、植物、酵母和细菌)的蛋白酶水解活性。 不需要称重或测量就能确保一致的结果
●便捷性:只需将速溶片从简易箔包装推出并加入缓冲液中即可。
●完善的保护:立即保护您的蛋白质免受广泛的蛋白酶的降解
●灵活性:几乎能够保护任何组织或细胞提取物中的蛋白质,包括动物、植物、酵母、细菌或真菌。
●安全性:选择对您或您周围的人没有任何风险的无毒抑制剂
·适用于 IMAC纯化:使用cOmplete组氨酸标记纯化树脂,纯化多组氨酸标记的蛋白质。