| 别称
APG3; APG3L
| ATG3 简介
自噬相关蛋白 3(ATG3)是 LC3 脂化过程的 E2 酶。它对自噬至关重要。超级蛋白复合物,即 Atg16L 复合物,由多个 Atg12-Atg5 共轭物组成。Atg16L 在 LC3 脂化反应中具有类似 E3 的作用。被激活的中间物 LC3-Atg3(E2) 被招募到发生脂化反应的部位。它由三个结构域组成,一个 N 端结构域、一个催化结构域和一个 C 端结构域。催化结构域包含一个 HPC 主题内的半胱氨酸残基,这是识别自噬体复合物 Apg5 亚单位的假定活性位点残基。小的C-末端结构域可能是自噬体复合物稳定性的一个独特的结合区域。
| 特异性
可检测样本中人的ATG3,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ng/mL) | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.312 | 0.156 | 0 |
OD值 | 2.22 | 1.56 | 0.92 | 0.63 | 0.42 | 0.25 | 0.18 | 0.08 |
校正OD值 | 2.14 | 1.48 | 0.94 | 0.55 | 0.34 | 0.17 | 0.1 | - |
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康人组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的人ATG3,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
组织匀浆(n=8) | 84-101 | 96 |
细胞裂解液(n=8) | 92-106 | 103 |
细胞培养上清(n=8) | 96-108 | 105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康人组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清中加入高浓度人ATG3,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 组织匀浆 | 细胞裂解液 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-97 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 92 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-114 |
平均回收率(%) | 94 | 98 | 107 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。