| 别称
secreted alkaline phos-phatase
| SEAP 简介
碱性磷酸酶(ALP, ALKP, ALPase, Alk Phos)属于同源二聚体蛋白,分子量为56KDa。每个单体由449个氨基酸组成,完整的AKP分子呈现典型的α/β的拓扑结构,同时每个单体均具有一个活性中心,活性中心区域由Asp101-Ser102-Ala103三连体、Arg166、水分子、三个金属离子及其配体氨基酸组成。AKP被phoA 基因编码,与很多分泌蛋白一样,在细胞质内合成氨基末端带有信号肽的单体前体,信号肽引导前体跨内膜运输后被切除,同源二聚体形成。
| 特异性
可检测样本中人的SEAP,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度单位(ng/mL) | 200 | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.12 | 0 |
OD值 | 2.14 | 1.63 | 1.16 | 0.78 | 0.57 | 0.36 | 0.24 | 0.07 |
校正OD值 | 2.07 | 1.56 | 1.09 | 0.71 | 0.5 | 0.29 | 0.17 | - |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的人SEAP,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
血清(n=8) | 84-101 | 96 |
血浆(n=8) | 92-105 | 102 |
细胞培养上清(n=8) | 96-109 | 105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度人SEAP,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 95 | 98 | 108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。