| 别称
ASC; CARD5; TMS1; Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD; Caspase recruitment domain-containing protein 5; Target of methylation-induced silencing 1
| PYCARD 简介
细胞凋亡相关斑点样蛋白(PYCARD)通常被称为ASC(含有CARD的凋亡相关斑点状蛋白),是一种由PYCARD基因编码的蛋白。它主要定位于单核细胞和巨噬细胞的细胞核。然而,在病原体感染的情况下,它迅速重新定位到细胞质、核周围空间、内质网和线粒体,它是激活炎症体的一个关键适应蛋白。该基因编码一个适应性蛋白,由两个蛋白-蛋白相互作用结构域组成:N端PYRIN-PAAD-DAPIN结构域(PYD)和C端caspase-recruitment结构域(CARD)。PYD和CARD结构域是六螺旋束死亡结构域折叠超家族的成员,通过激活caspase介导炎症和凋亡信号途径中大型信号复合体的组装。在正常细胞中,这种蛋白定位于细胞质;然而,在经历凋亡的细胞中,它在核周边附近形成球状聚集物。
| 特异性
可检测样本中人的PYCARD,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(pg/mL) | 1000 | 500 | 250 | 125 | 62.5 | 31.2 | 15.6 | 0 |
OD值 | 2.32 | 1.5 | 0.87 | 0.52 | 0.35 | 0.24 | 0.18 | 0.08 |
校正OD值 | 2.24 | 1.42 | 0.79 | 0.44 | 0.27 | 0.16 | 0.1 | - |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的人PYCARD,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
血清(n=8) | 84-102 | 97 |
血浆(n=8) | 92-105 | 102 |
细胞培养上清(n=8) | 96-108 | 105 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康人血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度人PYCARD,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 94 | 98 | 108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。