| 别称
PI3K; P110α; p110-alpha; Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase 110 kDa catalytic subunit alpha; Serine/threonine protein kinase PIK3CA
| PI3K 简介
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),是一个参与细胞功能的酶家族,如细胞生长、增殖、分化、运动、生存和细胞内贩运,而这些功能又与癌症有关。PI3K是一个相关的细胞内信号转导酶家族,能够使磷脂酰肌醇(PtdIns)的肌醇环的3位羟基磷酸化。该途径与癌基因PIK3CA和肿瘤抑制基因PTEN有关,与癌症肿瘤对胰岛素和IGF1的敏感性,以及热量限制有关。Lewis Cantley及其同事对PI3Ks的发现始于他们发现了一种以前未知的与多瘤中间T蛋白相关的磷酸肌苷激酶。他们观察到该脂质激酶的产物具有独特的底物特异性和色谱特性,从而发现这种磷酸肌苷激酶具有前所未有的能力,可以在肌醇环的3'位置上对磷酸肌苷进行磷酸化。随后,Cantley及其同事证明,在体内该酶更喜欢以PtdIns(4,5)P2为底物,产生先前在中性粒细胞中发现的新型磷酸肌苷PtdIns(3,4,5)P3。
| 特异性
可检测样本中人的PI3K,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ng/mL) | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.312 | 0.156 | 0 |
OD值 | 2.36 | 1.36 | 0.8 | 0.48 | 0.34 | 0.28 | 0.23 | 0.09 |
校正OD值 | 2.27 | 1.27 | 0.71 | 0.39 | 0.25 | 0.19 | 0.14 | - |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康人组织匀浆、细胞裂解液中加入3个不同浓度水平的人PI3K,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
组织匀浆(n=8) | 84-101 | 96 |
细胞裂解液(n=8) | 92-105 | 102 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康人组织匀浆、细胞裂解液中加入高浓度人PI3K,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 组织匀浆 | 细胞裂解液 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96 |
平均回收率(%) | 90 | 93 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 |
平均回收率(%) | 94 | 98 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。