| 别称
THIL; ACAT; T2; MAT; Acetoacetyl Coenzyme A Thiolase;Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 1
| ACAT1 简介
乙酰辅酶A乙酰转移酶1(ACAT1),也被称为乙酰乙酰辅酶A硫解酶(ACAT),是由ACAT1基因编码的酶。它是乙酰基辅酶A C-乙酰基转移酶。该基因编码一种线粒体定位酶,该酶催化乙酰辅酶A从乙酰辅酶A的两个分子中可逆形成乙酰辅酶A。ACAT1酶具有一些独特的性质。首先,它被CoA结合位点附近的钾离子结合和催化位点激活。此绑定会导致活动站点循环中的结构更改。此外,该酶能够使用2-甲基支链的乙酰乙酰辅酶A作为底物,使其成为一种独特的硫醇酶。它在转录和翻译水平上都受到调节。ACAT1酶活性增强通过瘦素、血管紧张素II和胰岛素在人单核细胞/巨噬细胞中转录促进ACAT1的表达。该的突变与编码蛋白线粒体乙酰乙酰辅酶A硫醇酶的缺乏有关;这也被称为酮硫醇酶缺乏症。它的表达与前列腺癌的表现有关。
| 特异性
可检测样本中小鼠的ACAT1,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ng/mL) | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.312 | 0.156 | 0 |
OD值 | 2.47 | 1.4 | 0.77 | 0.46 | 0.32 | 0.22 | 0.2 | 0.08 |
校正OD值 | 2.39 | 1.32 | 0.69 | 0.38 | 0.24 | 0.14 | 0.12 | - |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康小鼠组织匀浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的小鼠ACAT1,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
组织匀浆(n=8) | 91-105 | 102 |
细胞培养上清(n=8) | 96-108 | 104 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康小鼠组织匀浆、细胞培养上清中加入高浓度小鼠ACAT1,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 组织匀浆 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 88-98 | 90-110 |
平均回收率(%) | 93 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 98 | 107 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。