| 别称
CD243; ABCB1; ABC20; CLCS; GP170; MDR1; PGY1; P-Glycoprotein; Multidrug resistance protein 1; ATP-Binding Cassette,Sub-Family B(MDR/TAP),Member 1; Colchicin Sensitivity
| P-gp 简介
渗透性糖蛋白(P-gp 或 Pgp)也被称为多药耐药蛋白 1(MDR1)或 ATP 结 合盒亚家族 B 成员 1(ABCB1)或分化簇 243(CD243),是细胞膜的一种 重要蛋白,由 ABCB1 基因编码,将许多外来物质从细胞中抽出。它也是一 种 170 kDa 的跨膜糖蛋白,其中包括 10-15 kDa 的 N 端糖基化。分子的 N 端一半包含 6 个跨膜结构域,然后是一个带有 ATP 结合位点的大的细胞质结 构域,然后是第二部分,有 6 个跨膜结构域和一个 ATP 结合位点,与多肽的 前一半有超过 65%的氨基酸相似性。P-gp 广泛分布和表达在肠上皮细胞中, 它将异生物(如毒素或药物)泵回肠腔;在肝细胞中,它将其泵入胆管;在 肾脏近端小管细胞中,它将其泵入尿液滤液(在近端小管);在构成血脑屏 障和血睾丸屏障的毛细血管内皮细胞中,它将其泵回毛细血管中。
| 特异性
可检测样本中大鼠的P-gp,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ng/mL) | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.312 | 0.156 | 0 |
OD值 | 2.22 | 1.56 | 0.92 | 0.63 | 0.42 | 0.25 | 0.18 | 0.01 |
校正OD值 | 2.14 | 1.48 | 0.84 | 0.55 | 0.34 | 0.17 | 0.1 | - |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康大鼠组织匀浆、细胞裂解液中加入3个不同浓度水平的大鼠P-gp,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
组织匀浆(n=8) | 84-101 | 96 |
细胞裂解液(n=8) | 92-105 | 102 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆、细胞裂解液中加入高浓度大鼠P-gp,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 组织匀浆 | 细胞裂解液 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-96 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 |
平均回收率(%) | 94 | 98 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。