| 别称
Pyruvate kinase
| PK 简介
丙酮酸激酶(PK)是参与糖酵解的最后一步的酶。酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP变为ATP和丙酮酸,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,有M型和L型两种同工酶,M型又有M1及M2亚型。M1分布于心肌、骨骼肌和脑组织;M2分布于脑及肝脏等组织。L型同工酶主要存在于肝、肾及红细胞内。心肌细胞坏死后,PK释放入血,PK的测定可用于诊断心肌梗死。
| 特异性
可检测样本中小鼠的PK,且与其类似物无明显交叉反应。
| 典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ng/mL) | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 6.25 | 3.12 | 1.56 | 0 |
OD值 | 2.45 | 1.88 | 1.46 | 1.13 | 0.76 | 0.49 | 0.38 | 0.08 |
校正OD值 | 2.37 | 1.8 | 1.38 | 1.05 | 0.68 | 0.41 | 0.3 | - |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
| 重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%
| 回收率
在选取的健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的小鼠PK,计算回收率
样本类型 | 范围 | 平均回收率 |
血清(n=8) | 84-101 | 96 |
血浆(n=8) | 92-105 | 102 |
细胞培养上清(n=8) | 96-107 | 104 |
| 线性稀释
分别在选取的4份健康小鼠血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度小鼠PK,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例 | 回收率(%) | 血清 | 血浆 | 细胞培养上清 |
1:2 | 范围(%) | 84-95 | 88-95 | 90-110 |
平均回收率(%) | 91 | 93 | 96 | |
1:4 | 范围(%) | 89-103 | 87-108 | 105-115 |
平均回收率(%) | 94 | 98 | 108 |
注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。