外泌体研究技术服务
,专注于外泌体研究!
外泌体是什么?
外泌体(Exosome)是由细胞内多泡体与细胞膜融合后,释放到细胞外的一种直径约30~150nm的膜性囊泡。学术界主流观点认为外泌体的产生过程为:细胞膜内陷形成内体,然后再形成多泡体(MVB),最后分泌到细胞外成为外泌体。研究表明,所有类型哺乳动物细胞在培养过程中都可以分泌产生外泌体。外泌体是细胞分泌的膜性囊泡;外泌体是由活细胞分泌的一种亚细胞成分,由磷脂双分子及其携带的膜性分子组成;其主要成分为蛋白质、酶、mRNA、miRNA、DNA片段和脂质等。
Umibio服务优势:
1) 经验丰富,做外泌体研究早,近10年的研究经验积累;
2) 案例丰富,接触的样本类型很多,能针对性的进行操作;
3) 专心专注,只做外泌体领域,始终坚持外泌体深度研究;
4) 独立自主,从提取到鉴定,检测及后续研究,独立完成;
5) 诚信做事,完善的数据记录体系,实验结果经得起考验。
1:外泌体提取;
基础级:适用于常规基础实验研究;
Umibio外泌体提取试剂盒提取:适用于对得率要求比较高的实验;
超速离心法提取:采用经典超速离心的方法对样本进行外泌体的分离;
密度梯度离心:适用于杂质含量较高的样本进行外泌体的分离;
外泌体提取试剂盒
超离设备
密度梯度离心操作步骤
外泌体来源不同样本示意图
高纯级:大规模工艺法,采用高标准外泌体提取纯化工艺(切向流+层析等多种方法结合)
适用于大体量(≥1L)样本(如细胞上清)进行外泌体的分离,纯度高,可用于动物实验、工程化外泌体研究等;
GMP级:
GMP厂房; 适用于临床研究,详情请咨询。
2:外泌体鉴定;
粒径NTA:通过NTA粒径检测看囊泡颗粒数和颗粒范围;
设备:NS300
结果展示
粒径 纳米流式:通过纳米流式NanoFCM检测看囊泡颗粒数和颗粒范围;
设备:NanoFCM 结果展示:粒径图
电镜TEM:通过TEM透射电镜检测看清外泌体典型形态;
设备:HT7700
结果展示:电镜图
WB检测:通过WB检测CD63或TSG101等鉴定外泌体标志蛋白;
操作过程:外泌体蛋白浓度测定BCA+一个抗体一张膜进行检测;
目前可做抗体:CD63、CD81、TSG101、CD9、Alix等抗体;
结果展示:WB条带图
3:外泌体qPCR检测;
可检测基因范围广:mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等;
结果展示:扩增曲线
4:外泌体miRNA测序;
外泌体microRNA(miRNA)测序是利用高通量测序平台,对样本中富集到的18-32 nt的小RNA片段进行测序,对获得的有效数据进行序列长度分布统计,将筛选后的高质量序列分类注释,获得样品中包含的各组分及表达量信息,实现small RNA序列的鉴定、靶基因分析和功能注释等多项分析。
技术流程
结果展示
5:外泌体动物功能:小动物活体成像;
技术流程:通过DIR染料标记外泌体,通过尾静脉注射DIR-labeled Exosome,观察外泌体在体内的代谢情况;
结果展示
6:外泌体蛋白组学:
蛋白组学方法比较
设备展示
结果展示
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