图文详情
| 产品展示 |
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| 基本信息 |
图书名称： | 医学细胞生物学常用技术：原理和应用 |
作 者： | 易静 |
定价： | 32.00 |
ISBN号： | 9787040471465 |
出版社： | 高等教育出版社 |
开本： | 16 |
装帧： | 平装 |
出版日期： | 2017-7-1 |
印刷日期： | 2017-7-1 |
| 编辑推荐 |
| 内容介绍 |
| 《医学细胞生物学常用技术：原理和应用》内容分为五篇，包括观察细胞、细胞器和大分子的技术，操作细胞及其大分子的技术，分析细胞及其大分子的技术，分析细胞基本活动的综合技术和分析细胞信号转导的综合技术，重点展示了医学细胞生物学经典而常用的单元技术，以及新兴的和整合的技术，力求让读者由此领悟到各种技术的方法学原则，并通过应用实例理解其用途和用法，以促进对学生科学思维和创新能力的培养。 《医学细胞生物学常用技术：原理和应用》采用“纸质教材+数字课程”的出版形式。纸质部分主要展示细胞生物学常用实验技术的基本原理、发展历史及应用举例；数字课程提供技术的基本操作过程并推介应用该技术解决科学问题的典型文献，同时附有相应课件、技术细节和自测习题供读者浏览和思考。 《医学细胞生物学常用技术：原理和应用》适合用作高等医学院校相关课程的本科生和研究生教材，也可供相关科研人员参考 |
| 作者介绍 |
| 目录 |
| DY篇 观察细胞、细胞器和大分子的技术 DY章 显微镜技术 DY节 光学显微镜 第二节 激光扫描共聚焦显微镜 第三节 C高分辨率荧光显微镜技术 第四节 活细胞荧光工作站 第五节 电子显微镜 第六节 原子力显微镜 第二章 细胞化学技术 DY节 酶细胞化学技术 第二节 免疫细胞化学技术 第三节 原位杂交技术 第二篇 操作细胞及其大分子的技术 第三章 细胞结构成分的离心分离技术 DY节 差速离心法 第二节 密度梯度离心法 第四章 细胞培养技术 第五章 细胞工程技术 DY节 细胞融合技术 第二节 核酸分子导入细胞的技术 第三篇 分析细胞及其大分子的技术 第六章 流式细胞术 DY节 分析式流式细胞术 第二节 分选式流式细胞术 第七章 组织和细胞显微图像分析技术 DY节 组织和细胞几何参数的分析 第二节 荧光和染色的信号强度和阳性面积分析 第八章 定量分析mRNA的技术 DY节 RT-PCR技术 第二节 real-time PCR技术 第九章 分析蛋白质的技术 DY节 免疫印迹 第二节 免疫共沉淀 第三节 荧光共振能量转移（FRET）技术 第四篇 分析细胞基本活动的综合技术 第十章 检测细胞增殖 DY节 MTT法和CCK8法 第二节 Brd〔J参入法 第三节 细胞周期分析 第十一章 检测细胞衰老和死亡 DY节 衰老相关的β-半乳糖苷酶染色 第二节 AnnexinV标记 第三节 TUNEL标记 第十二章 检测细胞自噬 DY节 自噬过程和水平的电镜分析 第二节 LC3-II水平和LC3点状定位的检测 第三节 自噬流的评估 第十三章 检测细胞黏附和迁移 DY节 细胞一基质黏附实验 第二节 Transwell实验 第三节 划痕实验 第五篇 分析细胞信号转导的综合技术 第十四章 分析蛋白质修饰和活性 DY节 分析蛋白质修饰的方法（以磷酸化和SLJMO化修饰为例） 第二节 分析酶活性的方法（以激酶和SUMO蛋白酶为例） 第三节 分析转录因子活性的方法 第十五章 干预基因的表达和功能 DY节 野生型、截短体或突变体基因的强制过度表达 第二节 基因沉默和敲除 第十六章 分析蛋白质相互作用来验证蛋白质的功能和上下游关系 DY节 基因表达干预下的免疫共沉淀分析 第二节 基因表达干预下的蛋白质定位和相互作用分析 附录 综合实验：分析A基因对肿瘤细胞凋亡耐受的影响 实验一 肿瘤细胞的传代培养 实验二 pEGFP-A基因表达质粒的转染 实验三 转染细胞的荧光显微镜观察 实验四 转染细胞的活力检测 实验五 流式细胞仪检测细胞凋亡 |
| 在线试读部分章节 |
| 《医学细胞生物学常用技术：原理和应用》： DY节 组织和细胞几何参数的分析 组织和细胞几何参数的分析是图像分析处理中Z常用的方法。 【技术方法与步骤】 通过不同的样品制备和染色方法得到组织和细胞的切片，在适当的显微镜物镜倍率下，选取所需的视野。通过数码相机采集图像，通过图像样本的灰度直方图，我们可区分不同细胞组分的灰度阈值，经追踪处理后识别出各组分的边界，进而检测它们的面积、周长、形态因子等几何参数。 例如，在进行细胞核质比分析时，根据染色标本内不同组分灰度直方图确定核质各自灰度峰值，设定区分的阈值范围，分别测量细胞核和细胞质面积，可得到准确的核质比。通过对血管显微图像作形态分析和边界检测，可区分血管外膜、外弹力膜、中膜、内弹力膜、内膜和空腔的几何参数，从而测定它们的面积、周长和血管壁厚度，换算出它们之间的各种比例，用于心血管疾病的常规检测。通过对骨小梁、骨痂、成骨细胞等骨成分形态分析和比例测试，测定面积、周长、宽度和密度，换算出骨的体积参数，通过四环素荧光双标记，确定骨生长率，可以判别各种治疗方法对骨质疏松的治疗效果。对骨髓腔做连续CT片和骨小梁的连续骨片，通过图像处理后分析各组分的边界轮廓，经三维重建后能建立三维立体图像，分析图像的内部剖面形态结构，检测几何形态参数。 【应用举例】 骨小梁的几何参数测量 ●目的测量骨小梁面积，判断骨手术或药物治疗后骨质疏松的情况。 ●材料、试剂和方法骨小梁切片通过HE染色，在10倍物镜下选取若干个视野，原图通过对比度增强，突出骨小梁的显色。选取适当灰度阈值后，经二值化处理后生成黑白二值图，再经腐蚀膨胀等二值化处理方法清除骨小梁边缘的粘连杂质，然后通过擦碎片和填洞得到完整骨小梁白色图像。ZH经骨小梁特征提取后，选择所需几何参数进行测量，如面积、周长、厚度、骨小梁面积密度、骨小梁间距、节点数以及游离末端数等。 通过对不同组别的样品做图像处理，可得到一系列的分组数据，进行组间比较后，可对药物疗效、手术处理后的新骨生长和形成效果加以判断。 第二节 荧光和染色的信号强度和阳性面积分析 图像分析常用于定性和半定量测量，分析显色物所反映的生物大分子的表达水平，测定待测物质的面积密度（面积百分比）和数量密度（数量百分比），常用于待测物质的阳性表达率和特定区域的分布水平分析，如免疫组化、酶标记、原位杂交分析等，同时也适用于同位素标记的放射自显影等各类标记的检测和银颗粒分析的检测。【技术方法与步骤】定量分析是显微图像分析Z重要的应用手段，细胞经免疫细胞化学、原位杂交或特殊染色后，可以测定细胞内DNA、RNA和蛋白质等的相对含量，其原理是建立在朗玻一比尔（Lambert-Beer）定律基础上，细胞吸收光度取决于细胞内物质对特定波长光线能量的吸收能力。通过测量物质透光性，换算成光密度值来进行定量分析。因此图像分析需建立灰度值和光密度含量阈值转换表，通过对灰度的检测可JQ测定待测物的相对含量。酶相对含量也是一种定量分析，可通过检测酶标记物的灰度值强弱，转换后进行分析。荧光定量检测一般要建立荧光标准，常用荧光标准微球或铀玻璃作为参照物，细胞或组织经荧光标记后，通过对细胞内钙离子、细胞器、蛋白质和核酸等荧光图像做灰度值转换，可以对其荧光光通量做出JQ的定量分析，由于标记方法的不同，还可做多荧光标记的分析测量。目前常用现成的图像处理软件进行操作和分析 |
