色谱实验小课堂——液相色谱仪图谱常见问题原因及解决方案
实验小课堂
液相色谱仪图谱常见问题原因及解决方案
液相色谱因其广泛的分析能力被作为实验室分析常见的手段之一，液相色谱中的许多问题都可以从谱图上得到。有些问题可以通过改变设备参数得到解决；而问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。现对实验室常见问题峰形的原因分析及解决方案。
1.峰拖尾 2.峰前延 3. 峰分叉 4.面包峰 b、减少响应时间或使用更小的流通池 c、使用内径为0.007-0.01的短管路 d、减少响应时间原因 解决办法 1、筛板阻塞 a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 填充色谱柱 3、干扰峰 a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4、流动相PH选择错误 a、调整PH值。对于碱性化合物，低PH值 b、更有利于得到对称峰。 5、样品与填料表面的溶化点发生反应 a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱 原因 解决办法 1、柱温低 升高柱温 2、样品溶剂选择不恰当 使用流动相作为样品溶剂 3、样品过载 降低样品含量 4、色谱柱损坏 峰拖尾1.2.原因及解决方法 原因 解决办法 1、保护柱或分析柱污染 a、取下保护柱再进行分析 b、更换保护柱 c、分析柱阻塞，拆下来清洗的 d、柱子被强保留物质污染，再生 e、入口被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。 2、样品溶剂不溶于流动相 a、改变样品溶剂 b、流动相作为样品溶剂。 原因 解决办法 1、流动相组成变化 重新制备新的流动相 2、流动相流速太低 调节流速 3、漏液（特别是在柱子和检测器之间） 检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。 4、检测器设定不正确 调整设定 5、柱外效应影响
a、柱子过载
b、检测器对反应时间或池体积响应过大
c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大
d、记录仪响应时间太长a、减少进样量 6、缓冲液浓度太低 适当地增加浓度 7、保护柱污染或失效 更换保护柱 8、色谱柱污染或失效，塔板数较低 更换同样类型的色谱柱。
注：新柱子可以提供对称的色谱峰，则用强溶剂冲洗旧柱子。9、柱入口塌陷 打开柱入口，填补塌陷或更换柱子 10、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰 更换色谱柱以改善分离效果 11、柱温过低 提高柱温。
注：温度不宜超过75℃12、检测器时间常数太大 使用较小的时间常数
