ELISA先别做！答应我，看完了再做！
预实验是指在正式实验之前，用标准物质或只用少量样品进行实验，目的为摸索出最佳的实验条件，同时也可以检验实验设计的科学性和可行性，为正式实验打下基础。很多人不重视预实验，但我们认为预实验是一定要做的。 预实验 目的 提高实验的准确性和可靠性：ELISA是一种灵敏且特异性强的检测方法，广泛应用于各种抗原和抗体的测定。然而，由于多种因素的影响，如标本因素、操作因素、试剂因素等，可能会导致检测结果的误差。通过预实验，可以识别和优化这些潜在的影响因素，从而提高最终实验结果的准确性和可靠性。 确保试剂的有效性：在使用ELISA试剂前进行确认是保证检测准确性的关键环节。预实验可以帮助验证试剂的灵敏度和特异性，确保所使用的试剂能够满足实验需求。 优化实验条件：ELISA实验涉及多个步骤，包括抗体和抗原的结合、洗涤、显色反应等。通过预实验，可以探索最佳的实验条件，如标本的稀释倍数、孵育时间、洗涤次数等，以获得最佳的实验结果。 增强实验的可重复性：预实验还有助于评估不同实验室或设备之间的差异对实验结果的影响，从而确保实验结果的可重复性。 总之，进行ELISA预实验是为了确保实验的成功和结果的可靠性，通过优化实验条件和验证试剂的有效性，为最终的研究目标提供坚实的基础。 预实验 方法 首先需按说明书制备好样本；若说明书没提及，则需查找相应的样本处理方法； 所有用到的试剂要按说明书要求配制或准备，预实验一般设置2条带（16孔），操作步骤请参考说明书，酶标板具体设置如下： 以JL20268 小鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒为例，标准品OD值如下 待测样本为结肠组织匀浆上清液，选择不同的稀释倍数做预实验，其相应的OD值如下 通过标准品浓度与反应值，使用ELISA Calc软件，绘制标准曲线如下： （具体绘制教程：http://www.jonln.com/article/1918.html） 预实验 附录 以下用图例展示几个预实验的设计方案，以供参考。 参考文献 K. Klauenberg, M. Walzel et al. “Informative prior distributions for ELISA analyses..” Biostatistics (2015). 454-64 .. K. Klauenberg; M. Walzel; B. Ebert; C. Elster. Hejia Li, Yuhan Li et al. “Advance of modified ELISA and their application.” E3S Web of Conferences (2021).. Hejia Li; Yuhan Li; Yihan Xia. 朱晓明.浅析影响ELISA实验结果因素[J].中国畜禽种业,2017,13(06):30.. 朱晓明. V. Gurevich, P. Kotharu et al. “Improvement of ELISA procedures through simultaneous addition of antigen and detection antibody and elimination of washing steps.” Journal of immunoassay & immunochemistry (2017). 494 - 504.. V. Gurevich; P. Kotharu; K. McCann; J. Bertolini. 张敏.ELISA实验检测试剂使用前确认方法的探讨[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(29):123+125.. 张敏. 颜秀娟,邱昌文,袁婷等.浅谈ELISA试剂使用前的确认[J].中国医药指南,2012,10(02):283-285.. 颜秀娟; 邱昌文; 袁婷; 林丹英. 纪晓花.标本因素对ELISA测定结果的影响[J].中国医学创新,2011,8(07):133-134.. 纪晓花
