一文get如何进行ELISA试剂盒的选择!(文内附送万种试剂盒!)

 
点击 6123回复 0 原帖 07-19 16:29 IP属地 江苏南京

ELISA技术(酶联免疫吸附实验是一种常用的生物学实验技术,可以检测样品中定蛋白质的存在和数量。由于其灵敏度高、异性好、操作简单等点,ELISA试剂盒被广泛应用于以下领域。


生命科学研究

ELISA试剂盒可以用于检测细胞因子、激素、酶、抗体等分子的含量和活性,用于生理学、免疫学、分子生物学等研究领域。

临床医学诊断

ELISA试剂盒可以用于检测血清中的肿瘤标志物、病毒抗体、心肌酶等指标,用于临床诊断及疾病监测。

食品安全检测

ELISA试剂盒可以用于检测食品中的抗生素残留、农药残留等有害物质,用于食品质量检测和安全评估。

环境监测

ELISA试剂盒可以用于检测环境中的化学物质、微生物等污染物,用于环境监测和污染治理。

动物疾病防控

ELISA试剂盒可以用于检测动物血清中的病毒抗体、细菌抗原等指标,用于动物疫病防控和兽药残留检测。


ELISA试剂盒怎么选?



在选择 ELISA 试剂盒时,不同的用户往往有不同的选择标准,无论是灵敏度、样本类型还是简便性,核心标准是 ELISA 试剂盒的重现性。

试剂盒的应用种属、检测样本的种类

一般来说,生产厂家都会在产品名称上标明种属,ELISA试剂盒种属:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待检样本种类:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等。

试剂盒的检测范围

就是标准曲线范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标准曲线范围内,对于高浓度样本,需要先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。

特异性

就是阴性样本的阴性检出率,与试剂盒的关键组分—抗体对有关,确保抗体对杂质无交叉反应,交叉反应越小,特异性越好。具体要求是试剂盒尽可能采用单抗,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗。

灵敏度

灵敏度简单来说就是阳性样本的阳性检出率,反映的是试剂盒对于被检物质的最低检测能力。如果待测样本浓度很低,则需选择高敏的ELISA试剂盒。

精密性

又称重复性,是对同一样品重复测定时误差大小的评估参数。科学实验讲求重复性,一般而言,ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数,国产试剂的变异系数在20%内,进口试剂在15%内。

回收率

将已知的低、中、高浓度的标准品掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间。

稀释线性

公认的实验线性:样本稀释后,最终分析物浓度应该相同。在天然样本基质中添加有适当浓度的标准品,分别稀释不同倍数,测定各浓度下的回收率,线性通常介于80-120%之间。

稳定性

稳定性是试剂盒必需的基本属性,是指试剂盒在有效期内和规定条件下保持其性能的能力,一般有效期稳定性、运输稳定性以及冻融稳定性。一般以加速破坏性实验进行验证,将未拆封的试剂盒在37°C和2-8°C分别放置一定时间,考察各项性能指标的偏差,以偏差小于10%为合格。稳定性越好,试剂盒存储时间越长。

简便性

试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利越好。

品牌

一个品牌反映的不仅是产品质量的问题,更反映优质的售前售后服务。常见的高美誉度品牌进口的有Biorbyt,  R&D,BioLegend、Abcam,Raybiotech和MyBioSource等,国产的上海江莱,Elabscience,华美等也还不错。

文献引用

产品的文献引用特别是高质量的SCI文章引用是业界对产品认可的一个非常重要指标,对科研实验有一定的参考作用。



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