一文了解细胞冻存知识
近年来，通过输注免疫细胞或干细胞进行相关疾病的治疗取得良好疗效，细胞治疗技术展示出越来越广阔的临床应用前景。通常细胞从采集到临床应用会间隔很长时间，而新鲜细胞产品保存时限较短，为了延长细胞保存时限或长期保存细胞产品，需要对细胞进行冷冻后储存。
现在，华雅思创就带大家一起来了解一下细胞冻存的那些事儿~
细胞冻存是指将细胞放在低温环境，以达到减少细胞代谢的作用，从而达到对细胞进行长期储存进行保种的目的，以供后续实验或临床使用。 细胞冻存技术以液氮冷冻法为主，在实际冻存过程中，需要进行梯度温度冻存，并加入适量的保护剂以保证细胞内外的水分不会形成冰晶造成细胞的损伤或死亡。 华雅思创作为专业的生物试剂供应商，提供上千种生物试剂耗材，包括细胞培养基、冻存液、药包材、要用辅料、转染试剂等，有需求的朋友们可以联系我们哦~ 细胞内外的主要成分是水。如果细胞在没有保护溶液的情况下直接冷冻，细胞内外的水会凝结成冰晶，对细胞造成内源性的机械损伤。细胞内的水凝结引起的细胞脱水也会引起细胞内pH值的变化、蛋白质变性、细胞内部器官功能的丧失，甚至细胞核内的DNA损伤，最终可能导致细胞死亡。而冻存液往往都是易溶解的小分子物质，具有细胞渗透性，可以穿过细胞膜，进入细胞内，降低冰点，同时又可以提高细胞膜对水的通透性，使得细胞内水分渗出到细胞外，从而减少细胞内冰晶的形成。 对于一些特殊的细胞，如原代皮肤细胞，会额外添加表面保护剂，如海藻糖，以提高细胞存活率。 什么时候可以冻存细胞呢？ 在准备冷冻靶细胞之前，必须确保细胞处于最佳生长状态，可以观察以下指标： 1.培养基的颜色和浑浊情况 培养基的颜色可以指示细胞是否过度生长（例如，如果细胞是黄色，则表示它们过度生长）；介质的浑浊度通常表明存在污染，不适合冷冻。 2.细胞培养的时间 通常，建议将新恢复的细胞冷冻约两周。如果细胞连续培养两个月以上，性状率会发生一些变化，此时的细胞不适合冷冻。 3.细胞数目 在冻存过程中，每只冻存管内细胞最佳浓度为5x10^6个/ml—1x10^7个/ml，高密度或低密度对细胞存活率有一定影响。当细胞数量不足时，不建议冷冻细胞。 细胞冻存的降温过程？ 细胞冷冻保存过程是一个梯度冷却过程，液氮的温度可以低至-196℃，是保存的最佳冷冻介质。在这种低温条件下，细胞保存理论上是永久的。 1.人工传统降温法 冻存管置于4℃10 min → -20℃ 30 min → -80℃ 16-18 小时（或过夜，最长放置时间不要超过一个月）→ 转移至液氮长期储存。 2.借助冻存盒、细胞渐冻仪等工具 利用介质特性或制冷程序进行独立梯度冷却：将冷冻管放入细胞冷冻箱内（冷冻箱内需提前预冷至4℃，并检查箱内异丙醇或其他液体是否充足），然后将其置于-80℃冰箱中16-18小时（或过夜，最长储存时间不应超过一个月）→ 将其转移到液氮中长期储存。 如何选择细胞冻存液？ 细胞冻存液的质量和成分对细胞的冻存效果有很大的影响。如果细胞冻存液的成分不合适或质量不达标，可能会导致细胞冻存失败或细胞复苏后存活率低。 选择细胞冻存液时，应考虑以下3个重要因素： （1）细胞类型，不同的细胞类型对细胞冻存液的成分和浓度有不同的要求。 （2）冻存时间，细胞冻存的时间越长，对细胞冻存液的要求越高。 （3）复苏率，细胞冻存液的质量和成分对细胞的复苏率有很大的影响。 安杰优科技作为专业的生物试剂供应商，提供多种细胞冻存液，满足您不同的冻存需求，有需求的朋友们可以联系我们哦~ 现货促销 CELLBANKER 2冻存液 华雅思创为大家带来了爆款冻存产品CELLBANKER 2®冻存液，为你解决细胞冻存难题。 CELLBANKER 2®独特的配方允许在冻融程序后进行稳定的冷冻保存和高存活率，而没有污染血清的潜在风险。CELLBANKER 2®不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等污染，确保冻存细胞安全。 经过实验验证是最适合无血清培养细胞和肽/蛋白质表达细胞冷冻保存。 CELLBANKER 2®特点 1 即用型 无需进一步制备 2 高安全性 内毒素含量低 3 成分稳定 批次间差异小 4 活率高 活率 80% 以上 5 文献率高 客户都爱用 6 使用广 适合多种细胞冻存
