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荧光定量,不得不说的几个事!
qPCR技术原理:通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。qPCR本质上是普通PCR加上一套光学观察系统,普通PCR类似电影剧终时的一张照片(PCR扩增结果),qPCR则是完整的全部电影(PCR的全过程)。不同的检测目的,需要不同的荧光定量PCR仪器及与之对应的qPCR mix。qPCRmix的类型大致可以分为以下几个类别。
荧光定量PCR的神秘感,完全是人为因素造成的! B、进口品牌仪器厂商说:我们的仪器和试剂必须配套,效果才能最好! 实验室在最初花费大额经费购买PCR仪器时,也被强制性的购买了配套的试剂。“我们的仪器必须和我们的试剂配套!”“原配的试剂效果稳定,使用其他的试剂了问题,我们不负责!”。昂贵的仪器已经买了,试剂贵点也算合理吧!当实验室测试成功,“测试成功后就别折腾了,好不容易稳定的体系。”实验室老师如是说。 C、进口品牌代理商说:进口稳定靠谱,国产的不行 国内被高度垄断的qPCR市场,进口品牌拥有无与比拟的话语权。十多年来,客户使用进口的仪器和试剂,接受指导进口品牌的技术指导,看的是进口品牌代理商的广告,也就习惯了高价:这个实验本身就这么贵!国内厂商突破层层技术封锁,在qPCR上技术终于成熟,而价格却只有进口的几分之一,兴冲冲的拿到市场。而市场(进口品牌代理商)却说:进口稳定靠谱,国产的不行,不知道什么时候就会出问题! qPCR技术已经诞生二十多年,国内的qPCR仪器和试剂技术早已成熟,市面上简单快速的RNA提取试剂盒和一管化反转录试剂盒的开发, qPCR实验已不显那么昂贵和困难!qPCR实验的迷雾已经吹开,被锁住的实验需要放开了! 当国内没有qPCR技术时,进口厂商拥有定价权,我们只能硬着头皮接受。经多年的研发和多年的市场检验,qPCR技术国内已经成熟。仪器和试剂必须配套?对于一种通用常见的实验,这简直是个笑话,针对仪器开发试剂也并不是很难的事情。技术已经成熟,进口品牌十几年的超额利润时间,该结束了!原配试剂太贵了,而且也不一定好!荧光定量试剂的真实价格,该显现了!
qPCR实验部分和普通PCR的实验并没有多少差别,但价格怎么差那么多呢?上图荧光定量试剂成本并没有给出答案。这个试剂贵的不是成本,而是技术壁垒和市场话语权。
经多年科研攻关,终于突破国外厂商的专利封锁,北京聚合美研制的抗体法荧光定量Mix,具有超快速度,高特异性,高灵敏度,重复性好,定量准确,全封闭化反应杜绝污染等优点。聚合美进场,让荧光定量试剂不再那么昂贵,已经为北大、清华、中科院、中国农大等单位很多实验室节约大量经费,受到客户的热烈欢迎!