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手把手教学——移液器的结构和使用方法
移液枪是实验室最常用的仪器之一,是实验室不可或缺的基础实验仪器。
移液枪多少会影响一些精密实验的数据质量,细节决定成败,今天在这里跟大家普及一下移液枪的使用规程及注意事项,希望对大家以后的实验有帮助。
移液枪的结构及使用前检查
移液枪在使用前,应进行使用前检查:
检查刻度是否在最大值
旋转旋钮,检查读数是否准确
外观是否干净
按动按钮检查是否顺畅或者有噪音
校对调整移液枪
使分配的体积在一定的规格范围内
移液枪的使用
1、首先确定移液体积,选择合适量程的移液枪
移液枪吸头一般分为白,黄,蓝三种,其中0.1-2.5 ul,0.5-10 ul,2-20 ul使用白吸头;5-50 ul,10-100 ul,20-200 ul使用黄吸头;100-1000 ul使用蓝吸头。
大多数情况下移液枪不同颜色的控制按钮对应不同的枪头颜色,这是防止实验人员按错枪头的小方法。
2、容量设定
手柄的显示窗口确定移液枪的移液量,旋转控制旋钮设置量程。
从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,这样可以保证移液枪的精确度。
3、安装吸头
将移液枪顶端插入吸头,在轻轻用力下压的同时,轻微转动上紧即可。
注意将移液枪垂直插入吸头,用移液枪撞击吸头的方法是非常不可取的,长期这样操作回导致移液枪的零件因撞击而松散,严重会导致调节刻度的旋钮卡住。
4、吸液
吸液前吸头先在液体中预润洗,慢吸慢放,把控制按钮压至第一停点,吸头尖端浸入液面3 mm以下,垂直吸液,缓慢平稳松开按钮,吸入液体,再将吸头提离液面。
正确的入液深度较多可使准确度提高5%。微量移液枪的吸头入液深度应当为1-2 mm,大量程移液枪的吸头入液深度较高为3-6 mm,具体取决于吸头大小。
如果吸头入液太深,那么吸头中的气压会增大,导致吸入过多的液体。
5、放液
放液时,将吸头紧贴容器内壁,把控制按钮压到第二停点,将全部液体排出。
放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁。吸有液体的移液枪不应平放,吸头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈。
移液枪吸头在样品中的入液角度应当尽量接近90度,与垂直方向偏离不超过20度。角度太大可能导致吸头中吸入太多的液体,造成吸液不准确。
例如,在与垂直方向呈30度角时,可过多吸入达0.7%的液体。
5、退卸吸头
卸去吸头,用吸头卸却按钮卸去,将吸头打入废液缸。
移液枪的使用注意事项
1、移液枪在每次实验后应将刻度调至最大,让弹簧回复原型,延长移液枪的使用寿命。
2、吸取液体时不允许突然松开,要缓慢平稳地松开拇指,否则溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
3、为获得较高的精度,枪头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,枪头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
4、浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
5、可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。
6、在设置量程时,请注意旋转到所需量程数字清清楚楚在显示窗中,所设量程在移液枪量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液枪。
7、移液枪严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。
8、在进行高精度试验时,遇到粘度较大的液体,移液枪禁止快速吹打混匀液体,会产生误差。
9、不要用大量程的移液枪移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
10、如果进行RNA提取相关操作,事先用RNAzap进行除酶,并照射紫外30 min-1h,如果进行细胞相关实验,请在使用前后照射紫外30 min-1h,并在使用前用75%乙醇擦拭。注意酒精棉球不可太湿,酒精流吸头内会影响枪头气密性,并污染内容物。
11、所有的样品之间都应保持一致的移液节奏。避免匆忙或快速的操作,要掌握移液过程中每个步骤的节奏。
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